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湖北植物染色体原位杂交值得信赖「多图」

发布者:贝科新肽 发布时间:2025-10-09 11:48:39

湖北植物染色体原位杂交值得信赖「多图」[贝科新肽]内容:基因组原位杂交技术基因组原位杂交(Genome in situ hybridization,GISH)技术是20世纪80年代末发展起来的一种原位杂交技术。它主要是利用物种之间DNA同源性的差异,用另一物种的基因组DNA以适当的浓度作封阻,在靶染色体上进行原位杂交。GISH技术初应用于动物方面的研究(Pinkel et al.,1986),在植物上早应用于小麦和栽培种的鉴定(余舜武等 2001;王文奎等 2000)。

原位杂交技术方法大致可分为:1.杂交前准备,包括固定、取材、玻片和组织的处理,如何增强核酸探针的穿透性、减低背景染色等;2.杂交;3.杂交后处理;4.显示(visualization):包括性自显影和非性标记的显色。固定原位杂交组织化学技术在固定剂的应用和选择上应兼顾到三个方面:保持细胞结构,限度地保持细胞内DNA或RNA的水平;使探针易于进入细胞或组织。DNA是比较稳定的,mRNA是相对稳定的但易为酶合成和降解。RNA却绝然不同,非常容易被降解。因此,对于DNA的定位来说,固定剂的种类和浓度并不十分重要。相反,在RNA的定位上,如果要使RNA的降解减少到低限度,那么,不仅固定剂的种类浓度和固定的时间十分重要,而且取材后应尽快予以冷冻或固定。

原位杂交杂交液

(一)杂交液内除含一定浓度的标记探针外,还含有较高浓度的盐类、甲酰胺、硫酸葡聚糖、牛白蛋白及载体DNA或RNA等。

(二)杂交液中含有较高浓度的Na+可使杂交率增加,可以减低探针与组织标本之间的静电结合。

(三)贾酰胺可使杂交温度降低,所以杂交液中加入适量的甲酰胺,可避免因杂交温度过高而引起的组织形态结构的破坏以及标本的脱落。

(四)硫酸葡聚糖能与水结合,从而减少杂交液的有效容积,提高探针有效浓度,以达到提高杂交率的目的。

原位杂交技术还在以下生物领域有应用:

生态学和环境科学:在生态学和环境科学领域,原位杂交技术可以用于研究生物与环境之间的相互作用。例如,通过标记特定基因的探针,可以检测环境中微生物种群的分布和变化,进而研究其对环境的影响和作用。

进化生物学:在进化生物学领域,原位杂交技术可以用于研究物种之间的遗传差异和进化关系。例如,通过比较不同物种之间基因序列的差异,可以揭示物种之间的亲缘关系和进化历程。

以上信息由专业从事植物染色体原位杂交的贝科新肽于2025/5/8 11:48:39发布

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