ELISpot供应商解决的问题
ELISPOT 分析仪的出现解决了以下问题:
哪些斑点是抗原特异性 T 细胞产生的(此斑点具有进一步分析价值),哪些是无关细胞产生的(此斑点没有 T 细胞研究价值)
斑点大小的意义
在对不同细胞因子计数和分析时,如何定义斑点MIN和MAX尺寸
如何从单个细胞基础上分析
实验accurate度有多高?如果一个细胞产生相似的细胞因子,在多大程度上会干扰分析结果?
几次重复实验才能使结果更有意义?
ELISpot供应商原理
将细胞置于包被有特异性Antibody的96孔板中培养,在有刺激的条件下,细胞分泌的细胞因子或免疫球蛋白会被包被Antibody捕获。移除细胞后,被capture的细胞因子可进一步使用生物素标记的二抗来标识,其后再与酶标记的亲和素作用,并加入底物使其呈色,有反应作用的细胞会留下直径大小不等的stained spots。
1. 加入细胞到含有(或不含)刺激物中培养;
2. 阳性细胞开始分泌细胞因子,细胞因子就近被包被Antibody捕获;
3. 移出细胞,清洗板子,加入生物素标记的检测Antibody,形成“Antibody-抗原-Antibody”夹心结构;
4. 为了观察膜上斑点的形成,加入酶标记的亲和素;
5. 加入显色底物,在酶的催化分解下,生成不可溶的色素,就近沉淀在局部的膜上形成斑点;
6. 斑点计数(可用bioreader自动读板仪计数),数据处理,结果分析。
病毒噬斑病毒斑点分析仪
德国BIOSYS公司bioReader是针对35-100mm培养碟、载片、6-384孔多孔板和微量培养板的自动检测和分析仪器。主要用于免YI细胞功能研究,在单细胞水平检测细胞因ZI分泌情况或抗TI分泌情况病毒斑,菌落,克LONG斑,等微生物斑点实验分析。产品成熟,1000多篇文献,国内有100多个科研单位使用。
以上信息由专业从事ELISpot供应商的世联博研于2025/6/28 11:49:47发布
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