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免疫酶斑点试验供应商诚信企业「世联博研」

发布者:世联博研 发布时间:2024-05-18 06:23:56

免疫酶斑点试验供应商诚信企业「世联博研」[世联博研4dd77cf]内容:免疫酶斑点试验供应商原理

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免疫酶斑点试验供应商实验步骤与原理示意 (示意图如下)

大致原理上分为如下7个步骤,详情已具体产品说明书为准

Step.1 包被:将单clone捕获Antibody添加到乙醇处理的PVDF膜板上

Step.2 细胞孵育:在有刺激的情况下加入细胞,孵育,细胞分泌细胞因子

Step.3 捕获分泌物:activation后的细胞,分泌的细胞因子被周围的Antibody结合捕获

Step.4 检测Antibody:去除细胞,清洗平板,加入生物素化的检测Antibody

Step.5 链霉亲和素-酶偶联物:加入链霉亲和素偶联物,保证后续在膜上形成斑点

Step.6 加反应底物:当酶催化时,显色底物形成不溶性沉淀

Step.7 结果分析:在自动点阅读器中对结果进行分析。每个斑点对应一个分析物分泌细胞

免疫酶斑点试验供应商原理

免疫酶斑点试验供应商原理

将细胞置于包被有特异性Antibody的96孔板中培养,在有刺激的条件下,细胞分泌的细胞因子或免疫球蛋白会被包被Antibody捕获。移除细胞后,被capture的细胞因子可进一步使用生物素标记的二抗来标识,其后再与酶标记的亲和素作用,并加入底物使其呈色,有反应作用的细胞会留下直径大小不等的stained spots。

1. 加入细胞到含有(或不含)刺激物中培养;

2. 阳性细胞开始分泌细胞因子,细胞因子就近被包被Antibody捕获;

3. 移出细胞,清洗板子,加入生物素标记的检测Antibody,形成“Antibody-抗原-Antibody”夹心结构;

4. 为了观察膜上斑点的形成,加入酶标记的亲和素;

5. 加入显色底物,在酶的催化分解下,生成不可溶的色素,就近沉淀在局部的膜上形成斑点;

6. 斑点计数(可用bioreader自动读板仪计数),数据处理,结果分析。

以上信息由专业从事免疫酶斑点试验供应商的世联博研于2024/5/18 6:23:56发布

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